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中药学论文_雷公藤内酯醇衍生物对肝癌细胞增殖
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摘要:文章目录 1 材料与方法 1.1 细胞及培养 1.2 药物及试剂 1.3主要仪器 1.4 TPL衍生物制备 1.4.1 TP-3-OH的制备 1.4.2 TPO的制备 1.5 细胞毒性实验 1.6 MTT法检测细胞增殖 1.7 流式细胞术检测细胞凋亡
文章目录
1 材料与方法
1.1 细胞及培养
1.2 药物及试剂
1.3主要仪器
1.4 TPL衍生物制备
1.4.1 TP-3-OH的制备
1.4.2 TPO的制备
1.5 细胞毒性实验
1.6 MTT法检测细胞增殖
1.7 流式细胞术检测细胞凋亡
1.8 Western Blot法检测凋亡通路相关蛋白的表达
1.9 细胞划痕实验
1.1 0 统计学处理方法
2 结果
2.1 TPL、TP-3-OH、TPO对正常肝细胞的毒性作用
2.2 TP-3-OH、TPO对LO2细胞及肝癌细胞增殖的影响
2.3 TPO对LO2细胞及肝癌细胞凋亡的影响
2.4 TPO对肝癌细胞凋亡通路相关蛋白表达的影响
2.5 TPO对SMMC-7721肝癌细胞迁移能力的影响
3 讨论
文章摘要:目的研究新型雷公藤内酯醇(Triptolide,TPL)衍生物对正常肝细胞的毒性以及对肝癌细胞的增殖、凋亡作用。方法通过对TPL进行化学修饰,获得2种新型衍生物:雷公藤内酯三醇(TP-3-OH)和丙烯酸雷公藤甲素酯(TPO)。通过体外培养人胚胎肝细胞LO2和肝癌细胞Hep G2、Hep3B、SMMC-7721,分为DMSO对照组,TPL/TP-3-OH/TPO低、中、高浓度组(25、50、100 nmol·L-1)。通过检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性来评价TP-3-OH、TPO对肝细胞的毒性;采用MTT实验检测细胞增殖情况;采用流式细胞术及Western Blot法检测细胞凋亡及凋亡通路相关蛋白表达情况;采用划痕实验检测细胞迁移能力。结果与TPL组比较,50、100 nmol·L-1浓度条件下TP-3-OH、TPO组的LO2细胞培养上清中的LDH活性明显降低(P<0.05,P<0.01)。与DMSO对照组比较,TPO中、高浓度(50、100 nmol·L-1)组的LO2细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05,P<0.01),TPO低、中、高浓度(25、50、100 nmol·L-1)组的Hep G2、Hep3B、SMMC-7721肝癌细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.05,P<0.01);TPO高浓度(100 nmol·L-1)组的LO2、Hep G2和SMMC-7721细胞的早期、晚期细胞凋亡率均明显升高(P<0.05,P<0.01);TPO中、高浓度(50、100 nmol·L-1)组SMMC-7721、Hep G2细胞的cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达显著上调(P<0.01);TPO中浓度(50 nmol·L-1)组SMMC-7721细胞的24 h迁移率明显降低(P<0.05)。结论经化学修饰获得的2种新型TPL衍生物对肝细胞的毒性降低,其中TPO具有抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。
文章关键词:
文章来源:《中华肝脏病杂志》 网址: http://www.zhgzbzzzz.cn/qikandaodu/2022/0125/958.html